聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的原理

SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)是一种用于根据蛋白质混合物的大小分离其成分的分析方法。

该技术基于这样的原理,即带电分子将在电场中朝具有相反符号的电极迁移。常规电泳技术不能用于确定生物分子的分子量,因为物质在凝胶中的迁移率取决于电荷和大小。

为了克服这个问题,需要对生物样品进行处理,以使其获得均匀的电荷,然后电泳迁移率主要取决于尺寸。对于这种具有不同形状和大小的蛋白质分子,需要进行变性(在SDS的帮助下完成),以使蛋白质失去二级,三级或四级结构。被SDS覆盖的蛋白质带负电,并在上样时凝胶并置于电场中,它将朝着阳极(带正电的电极)迁移,并通过基于分子筛分作用的大小分开。通过染色(蛋白质特异性)技术进行可视化后,可以通过将蛋白质的迁移距离与已知分子量阶梯(标记)的迁移距离进行比较来计算蛋白质的大小。

XML 地图 | Sitemap 地图